CHAPS es un compuesto orgánico con fórmula molecular C ₃₂ H ₅₈ N ₂ O ₇ S y peso molecular 614.877. CHAPS es un tipo de detergente zwitteriónico, ampliamente utilizado en el proceso de purificación de proteínas. CHAPS también se puede utilizar en la investigación bioquímica para desnaturalizar y dividir células, extraer ARN y ADN; Además, CHAPS también se puede utilizar para la preparación de solución tampón. La patente CN106478786A describe un método para extraer proteína intracelular eficaz de la bacteria de desulfuración. CHAPS se utiliza como tensioactivo anfótero en la patente. Los pasos específicos del esquema son los siguientes:

(1)  cultivo de activación de bacterias de desulfuración, cultivo de fermentación líquida, tomar el caldo de fermentación, centrifugar, eliminar el sobrenadante y recoger el sedimento inferior;

(2)  Tome el precipitado en las capas media e inferior del paso (1), agregue 1~2 ml/g de solución de craqueo (el líquido de craqueo es la solución acuosa de urea, tensioactivo anfótero y agente protector reductor, en el que el tensioactivo anfótero es CHAPS), revuélvalo magnéticamente a 0~4 ℃ y colóquelo en - 18~- 22 ℃ durante 8~10 horas.

(3)  La sustancia congelada en el paso (2) se rompe ultrasónicamente a 0~4 ℃ y luego se coloca de nuevo a -18~- 22 ℃ durante 8~10 horas;

(4)  La sustancia congelada en el paso (2) se rompe ultrasónicamente a 0~4 ℃ y luego se vuelve a colocar a -18~- 22 ℃ durante 8~10 horas;

(5)  Tome la solución de proteína sobrenadante obtenida por centrifugación en el paso (4), agregue la solución mixta orgánica, mezcle y agite completamente y centrifugue;

(6) Después de centrifugar la mezcla en el paso (5), retire el sobrenadante, agregue el solvente orgánico, mezcle y agite completamente y centrifugue la mezcla;

(7)  Repita el paso de operación (6) de 2 a 4 veces, retire el sobrenadante de la mezcla centrifugada, liofilícelo, séllelo y guárdelo a 0-4 ℃ .

Esta patente realiza la separación y purificación de la proteína intracelular efectiva de la bacteria de desulfuración a través de la centrifugación del caldo de fermentación, fragmentación celular, extracción y purificación de proteínas. Es un método de extracción fácil de operar, de bajo costo, seguro y confiable.

Referencia

CN106478786A Un método para extraer proteína efectiva de bacterias de desulfuración.