enfermedad genética se refiere a una enfermedad causada por un cambio en el material genético o controlado por un gen causante de la enfermedad. en la actualidad, el diagnóstico de enfermedades genéticas adopta principalmente el método de la citogenética, es decir, el análisis de cariotipo, que es de gran importancia en el diagnóstico y la detección de enfermedades genéticas. La clave para el cariotipo es cultivar linfocitos calificados. el medio de cultivo de linfocitos tradicional utiliza un sistema tampón de bicarbonato de sodio, que es fácilmente afectado por el dióxido de carbono en el medio ambiente. a medida que se prolonga el tiempo de almacenamiento, aumenta el valor de ph, lo que no es propicio para la conservación del medio. Para superar los problemas técnicos anteriores, los investigadores utilizaron Ácido 4-hidroxietilpiperazineetanosulfónico (Hepes) para desarrollar un medio de ph más estable.
el medio de linfocitos está compuesto por 1640 medio basal, fitohemaglutinina (pha, 100 mg / l), suero de ternera (20% en volumen) y sistema de doble tampón de glicerofosfato de sodio / hepes (5 ~ 50 mm). el sistema de doble tampón de glicerofosfato de sodio / hepes consiste en tampón fosfato (na2hpo4 y kh2po4), glicerofosfato de sodio y hepe). los componentes específicos y las concentraciones se muestran en la tabla 1 a continuación.
componente |
concentración |
medio basico |
1640 mediano |
pha |
100 mg / l |
glicerofosfato de sodio |
3g / l |
hepes |
3g / l |
n / A 2 hpo 4 |
2g / l |
kh 2 correos 4 |
1g / l |
suero de ternera |
20% |
tomar los componentes del medio anterior, agregar al agua ultrapura, de modo que los componentes estén completamente disueltos; Añadir agua ultrapura a volumen, filtrar y esterilizar.
el medio de cultivo de linfocitos utiliza un sistema de tampón de glicerofosfato de sodio / hepes, no tiene ningún efecto sobre el cultivo posterior de las células y puede estabilizar el ph de las células; El sistema de tampón no se ve afectado por el dióxido de carbono en el medio ambiente y los componentes de gas restantes, y es beneficioso para la conservación a largo plazo del medio.
[1] Medio de cultivo de linfocitos con pH estable y método de preparación y su aplicación. cn104988120b, 2018-12-18.
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