Durante el brote de COVID-19 , el diagnóstico rápido de ácidos nucleicos es extremadamente importante para la prevención y el control de la epidemia. La extracción de muestras de ácidos nucleicos se divide en dos partes: disociación de proteínas y ácidos nucleicos y extracción de ácidos nucleicos. La extracción y purificación de ácido nucleico actual utiliza principalmente adsorción de resina o adsorción de perlas magnéticas, lo que requiere una centrífuga de alta velocidad o un instrumento automático de extracción de ácido nucleico, lo que lleva mucho tiempo. Para resolver los problemas existentes, Li Xiaofeng y otros han desarrollado una solución de disociación de ácidos nucleicos. La solución de disociación está compuesta de isotiocianato de guanidina , fenol saturado de agua, agente reductor de alcohol y 8-hidroxiquinolina. Los componentes y sus concentraciones y valores de pH son los siguientes ^[1] :

Isotiocianato de guanidina : la concentración molar es 1mol/L-2mol/L;

Fenol saturado de agua: la concentración porcentual en masa es 25%-50%;

Agente reductor de alcohol: El agente reductor de alcohol es 2-mercaptoetanol o ditiotreitol, y la concentración porcentual en masa es 0.175%-0.35%;

8-Hidroxiquinolina: la concentración porcentual en masa es 0,05%-0,1%;

El pH de la solución de disociación es 7,0-8,5.

La aplicación combinada de la solución de disociación y la columna de gel tiene los siguientes efectos beneficiosos:

(1) Las células se lisan rápidamente, la extracción de ácido nucleico se puede completar en 1 minuto y el ácido nucleico extraído por la disociación se puede usar directamente en la reacción de PCR, lo que acorta en gran medida el tiempo de operación completo del diagnóstico de ácido nucleico de PCR;

(2) La integridad del ácido nucleico se puede mantener durante mucho tiempo: desde el muestreo de muestras, el transporte hasta la extracción de ácido nucleico en el laboratorio, puede mantener la integridad del ácido nucleico en tan solo tres minutos y hasta una semana;

(3) No es necesario estar equipado con equipos costosos, solo una centrífuga de mano.

Referencias

[1] CN 112159806 B Aplicación de una solución de disociación de ácidos nucleicos en la extracción y purificación de ácidos nucleicos.