método de sds-pagese usa para separar las proteínas antes del análisis por ms. y ejecutando buffers, talescomo glicina o tricina, tendrá un efecto en la separación de proteínasproceso. Los sistemas de búfer de ejecución basados ​​en Tricine se han aplicado con éxito enla separación de varios tipos de proteínas

aunque tricine-dsds-pagees una herramienta poderosa en la separación de proteínas de membrana, williams et al. (doi: 10.1002 / elps.200500730)También exploró otros sistemas de almacenamiento intermedio en conjunción con el enfoque dsds-pagey describir un ortogonal bicine -dsds-page método para el análisis de membranaproteínas de la bacteria anaerobia, clostridiumthermocellum . y compararon los sistemas de glicina, tricina y bicina-dsds-page.

en primer lugar, thermocellum cultivos celulares se cultivaron en55 ° cy cosechado y glycine-, tricine-, y bicine-dsds-page se usaron parasepara las proteínas en la primera dimensión usando el protocolo laemmli, luegomayor separación en la segunda dimensión. debido a geles de sds-page y funcionandolos buffers se operan normalmente en el rango de 6.6-8.8 ph, que hace bicine- (phrango de 7.6-9.0) y sistemas de búfer basados ​​en tricina (rango ph de 7.4-8.8)algo más adecuado. y de acuerdo con los resultados experimentales de la primeradimensión, los parámetros optimizados para la separación de gel en bicine- y tricine-dsds-pagese obtuvieron. basado en los parámetros optimizados obtenidos, experimentos de gran formatose realizaron para mejorar aún más la representación de proteínas y aumentar la proteínacapacidad de carga del gel

en el trabajo de williamset al., encontraron utilizando sistemas de tampones electroforéticos distintos delEl enfoque tradicional Laemmli aumenta la resolución y la representación de la membranaproteínas. y se encontró que bicine-dsds-page proporcionaba la mejor separacióncondición de todos.

editado por suzhou yacoo science co., ltd .