¿Gorras, marcador molecular o tampón bioquímico?
2019-01-18 11:07:29
en experimentos bioquímicos, la abreviatura "gorras" aparece con frecuencia y tiene dos significados completamente diferentes.
1. Marcadores moleculares escindidos de secuencias polimórficas amplificadas
tapasbuffer， Secuencias polimórficas amplificadas escindidas, también conocidas como rflp-pcr, que se utilizan principalmente para el análisis de restricción de fragmentos de ADN amplificados con pcr. Es una técnica para diseñar cebadores específicos basados en secuencias génicas est o publicadas, y para combinar la PCR específica con la digestión con enzimas de restricción para detectar el polimorfismo.
Con el desarrollo de la tecnología de biología molecular, la tecnología de marcadores moleculares de ADN también se ha desarrollado rápidamente. hay docenas de marcadores moleculares, como rflp, aflp, sts, caps, scar, ssr, snp, rapd, issr, trap, etc., son ampliamente utilizados en el mejoramiento genético, mapeo genómico, mapeo genético, identificación filogenética de especies, Construcción de bancos de genes, clonación de genes, etc. diferentes marcadores moleculares tienen diferentes ventajas y desventajas, y sus aplicaciones principales también son diferentes. caps tiene las ventajas de la co-dominancia, la especificidad del sitio, la operación simple y el bajo costo, y se ha utilizado ampliamente en el genotipado de plantas, la localización, la clonación, la identificación molecular y la diversidad genética de los animales, la identificación de variedades, los mapas de ligamiento y la identificación de microorganismos. Tiene las siguientes características:
(1) hay muchas combinaciones de cebadores y enzimas de restricción, lo que aumenta la posibilidad de revelar polimorfismos, es fácil de operar y puede analizarse mediante electroforesis en gel de agarosa;
(2) en los eucariotas, el marcador de mayúsculas es codominante, que puede distinguir entre genotipos homocigotos y genotipos heterocigotos;
(3) la cantidad de ADN requerida es pequeña y la concentración de ADN no es crítica;
(4) los cebadores utilizados son más largos, los resultados de la amplificación son más estables, y se evita la etapa de transferencia de membrana en el análisis de rflp, y se puede mantener la precisión del análisis de rflp;
(5) la operación es simple, rápida y altamente automatizada.
aunque el marcador de mayúsculas tiene muchas ventajas, debido a que debe usar una enzima de restricción, la selección de una combinación de enzimas adecuada requiere mucha mano de obra y se ha encontrado que el número de sitios de escisión mutantes es limitado, lo que limita su desarrollo a gran escala y solicitud.
2. tampón bioquímico—ácido n-ciclohexil-3-aminopropanosulfónico
la fórmula molecular de los casquillos es c9h19no3s, el valor pka es 10.4 a 25 ° C, el rango del buffer es 9.7 ~ 11.1. Si bien et al. no introduce las mayúsculas, en algún momento también se denomina "búfer de buena". Sus áreas de aplicación son las siguientes:
(1) utilizado como un tampón de transferencia para transferencia de difusión y electrotransferencia;
(2) tampón de unión y eluyente en cromatografía de intercambio catiónico;
(3) tampón de funcionamiento en electroforesis capilar;
(4) solución de cristalización efectiva para varias proteínas;
(5) tampón de ensayo enzimático
(6) apoyan la actividad de la fosfatasa alcalina e inhiben el crecimiento de aeromonas spp. a ph 10.5;
(7) adecuado para su uso con el ensayo de ácido bicinconínico (bca).
La receta del tampón de tapas, 50x:
Disolver 111 g de cápsulas (Ácido 3- [ciclohexilamino] -1-propanosulfónico) en h2o, y ajuste el ph a 10.5 con naoh. Sube el volumen final a 1 litro con h2o. La concentración final será de 500 mm.
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