las proteínas son responsables de reacciones bioquímicas complejas y tienen una estructura tridimensional específica cuando se ejercen funciones biológicas. en las pruebas bioquímicas, los investigadores a menudo necesitan estudiar la desnaturalización y la renaturalización de las proteínas,clorhidrato de guanidinay la urea son los reactivos usados más comúnmente, ¿cuál es la diferencia entre estos dos reactivos? ¿cuál es mejor?
hay dos mecanismos para la desnaturalización de proteínas con hidrocloruro de guanidina y urea:
(1) la proteína desnaturalizada se combina preferentemente con hidrocloruro de guanidina y urea para formar complejos. con el aumento de la concentración de desnaturalizante, la proteína en estado natural se transforma en compleja, dando como resultado una desnaturalización completa;
(2) la solubilización del hidrocloruro de guanidina y la urea para residuos de aminoácidos hidrofóbicos: hidrocloruro de guanidina y urea pueden formar enlaces de hidrógeno, que pueden romperse en la solución acuosa de alta concentración (4 ~ 8 mol / l) para convertirse en un mejor disolvente para no - residuos polares, de modo que la solubilidad de las moléculas de proteína dentro de los residuos hidrofóbicos aumenta y se produce la degeneración.
¿Cuál es la diferencia entre hidrocloruro de guanidina y urea?
- concentración: a temperatura ambiente, 3 ~ 4 moles / l de hidrocloruro de guanidina pueden hacer que la proteína globular pase al punto medio desde el estado natural al estado de desnaturalización; aproximadamente 6 mol / l de hidrocloruro de guanidina pueden hacer que la proteína se encuentre completamente en estado de degeneración. mientras que algunas proteínas globulares no pueden desnaturalizarse por completo incluso en una solución de 8 mol / l de urea.
- solubilidad: la urea se disuelve lenta y débilmente que el hidrocloruro de guanidina. su solubilidad es 70% ~ 90%. la solubilidad del hidrocloruro de guanidina es más del 95%.
en general, como reactivos de uso común en la desnaturalización de proteínas, hidrocloruro de guanidina (50-01-1) tiene una capacidad de disolución relativamente fuerte y una capacidad desnaturalizada y no causa la modificación covalente de la proteína recombinante, pero tiene las desventajas de un alto coste, una precipitación fácil en condiciones ácidas y una interferencia con la cromatografía de intercambio iónico de proteína; la solubilidad de la urea es relativamente débil, sin embargo, tiene las ventajas de la no ionización, la neutralidad, el bajo costo y la ausencia de precipitación de proteínas después de la renaturalización de la proteína.
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