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Kit de enriquecimiento y extracción de ADN con clorhidrato de guanidina. 2019-07-05 13:57:25


los ácidos nucleicos incluyen ácido desoxirribonucleico (ADN) y ácido ribonucleico (ARN), y son una clase de macromoléculas biológicas con información genética. El estudio encontró que el ADN libre también contiene información genética muy importante. por lo tanto, en los últimos años, la investigación de ADN libre se ha convertido en un campo candente en la investigación de diagnóstico genómico molecular y se ha aplicado gradualmente en todas las etapas, desde el diagnóstico inicial del tumor hasta el tratamiento y el desarrollo. Sin embargo, la técnica de extracción de ADN libre todavía necesita mejoras adicionales.


los investigadores desarrollaron un kit gratuito de extracción y enriquecimiento de ADN y un método para extraer ADN libre, con el objetivo de resolver el problema técnico de que el solvente orgánico tiene cierta toxicidad en el método de extracción de ácido nucleico libre existente.


Kit gratuito de extracción y enriquecimiento de ADN.

el kit incluye lisado de muestra, solución de unión, lavado primario, lavado secundario, eluyente y perlas nanomagnéticas:


  • los componentes del lisado de la muestra incluyen agua libre de nucleasas, reactivo a y reactivo b. el reactivo a es al menos uno de isotiocianato de guanidinio, clorhidrato de guanidina , yoduro de sodio y perclorato de sodio. el reactivo b es al menos uno de tween20, triton-x100, sds, np40 y un tensioactivo no iónico de tipo polioxietileno;
  • Además de los componentes del lisado de la muestra, la solución de unión también incluye el reactivo c, que es al menos uno de isopropanol y etanol absoluto;
  • la composición de la solución de lavado primario es la misma que la solución combinada;
  • el segundo líquido de lavado es uno de agua libre de nucleasas, una concentración molar de solución de cloruro de sodio 0,1 ~ 1 m, tampón tris o tampón te;
  • el eluyente es uno de agua libre de nucleasas, tampón tris o tampón te;
  • El núcleo magnético de las perlas nano-magnéticas es fe-co-niox. La distribución del tamaño de partícula está entre 300-400nm. la capa superficial del núcleo magnético está recubierta con al menos una capa de carbono y una capa de sílice inorgánica desde adentro hacia afuera. y el polietilenglicol se injerta covalentemente en la capa más externa.



método de extracción de ADN libre


  • agregue la proteasa k primero, luego agregue la muestra y la secuencia del lisado, agregue los componentes en el tubo de centrífuga, agite e incube para llevar a cabo la lisis de la muestra;
  • las perlas nano magnéticas y la solución de unión se proporcionan para formar una solución nano magnética de unión de perlas;
  • agregue la solución de unión de perlas magnéticas nano preparadas a la muestra, agite y mezcle, y deseche el sobrenadante;
  • lavar el ADN libre con una solución de lavado;
  • lavar el ADN libre con una solución de lavado secundario;
  • agregue el eluyente y agite para resuspender las nanocuentas y agite aún más para eluir el ADN libre de las nanocuentas.


el método no utiliza reactivos tóxicos como el benceno y el cloroformo en el método tradicional para minimizar el daño a los operadores experimentales, cumplir plenamente con el concepto moderno de protección ambiental y satisfacer mejor las condiciones de uso clínico; lisis, desnaturalización y promoción del enriquecimiento de ácidos nucleicos, la mayoría de las muestras no requieren un uso adicional de proteinasa k y lisado de muestra; lleva menos tiempo y es fácil de operar para todos los procesos de unión, lavado y elución a temperatura ambiente.


referencia

Kit de extracción y enriquecimiento de ADN libre y método de extracción de ADN libre. cn109913447a, 2019-06-21.


editado por suzhou yacoo science co., ltd.

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