tris (hidroximetil) aminometano(tris), también conocida como trometamina, es una base débil comúnmente utilizada como un sistema de tampón biológico en la producción de productos biológicos. puede causar hipoglucemia, hipotensión, náuseas, vómitos, ingesta excesiva o insuficiencia renal puede causar alcalemia, también inhibir la respiración e incluso dejar de respirar. por lo tanto, es necesario probar el contenido de tris en productos biológicos. ¿Entonces como detectarlo?

en la actualidad, la detección cuantitativa de tris adopta principalmente el método de titulación ácido-base, pero su límite cuantitativo es alto y es susceptible a la interferencia de varios grupos de bases ácidas. Los productos biológicos contienen una gran cantidad de grupos carboxilo, grupos amino y aniones y cationes, por lo que el tris en el producto no puede detectarse cuantitativamente por titulación.

Para resolver los problemas anteriores, los investigadores [1] inventaron un método para detectartris bufferen productos biológicos por cromatografía iónica, y los pasos específicos son los siguientes:

(1) el agua para inyección se agrega al producto biológico liofilizado para disolver y filtrar, o la solución acuosa biológica se filtra directamente y el filtrado se toma como la solución de prueba; Tris se agrega al agua para inyección para disolver, y la solución de diferentes concentraciones se obtiene como una solución de referencia después del gradiente de dilución;

(2) se utilizan un detector amperométrico de pulso y el método de reposición posterior a la columna. la columna era una columna de intercambio catiónico cs16 con una fase móvil de 40 mmol / l de solución de ácido metanosulfónico a un caudal de 1 ml / min. la reposición posterior a la columna fue una solución alcalina de hidróxido de sodio o hidróxido de potasio a una concentración de 500 mmol / l con un caudal de 0,3 ml / min;

(3) el análisis cuantitativo utilizó el método estándar externo, se probaron las diversas concentraciones preparadas de la solución de referencia y se dibujó la curva estándar de área de pico de concentración para obtener la ecuación de regresión de la curva estándar; la solución de muestra se probó en las mismas condiciones y el contenido de tris en la muestra de prueba se calculó mediante la ecuación de regresión anterior.

el límite de detección es 3.14 × 10-5mmol / l, el límite mínimo de cuantificación es 1.05 × 10-4mmol / l, la tasa de recuperación es 93.8% ~ 100.1% y el rango de reproducibilidad es 0.10% ~ 0.52%. (rsd, n = 5).

comparado con el método tradicional de titulación ácido-base, el método tiene un límite de detección más bajo y un límite de cuantificación más bajo, y no está interferido por el grupo de base ácido transportado en la proteína y no está interferido con el anión y el catión en la muestra No requiere derivatización y preparación compleja de la muestra. puede detectar el contenido de tris (cas 77-86-1) en diferentes productos biológicos, tiene buena selectividad y no tiene otra interferencia máxima en la región de tiempo de retención de tris. tiene una alta sensibilidad de detección y una velocidad de análisis rápida, y se puede aplicar a la detección de contenido y evaluación de calidad de tris en productos biológicos de industrias relacionadas.

referencia

[1] yu xiaoping, yu jin. Un método para la determinación de tris en productos biológicos por cromatografía iónica. 2018, cn107782829a.