en experimentos bioquímicos, la solución tampón desempeña un papel indispensable, que puede resistir el impacto de una pequeña cantidad de ácido fuerte y álcali, manteniendo el valor de pH más cercano al entorno fisiológico. agente de almacenamiento hepes - un agente tamponador químico orgánico zwitteriónico con un intervalo de tampón efectivo de 6.8 ~ 8.2, que puede utilizarse en una amplia gama de reacciones bioquímicas. se usa comúnmente en la investigación de orgánulos y proteínas y enzimas sensibles al ph altamente desnaturalizadas, así como de kits de diagnóstico bioquímicos, kits de extracción de ADN / adn y kit de diagnóstico de la pcr.

luego, cómo preparar y usar hepes ( Ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinaetanosulfónico )?

sobre la preparación de la solución de buffer Hepes, hay diferentes puntos de vista en documentos separados. dependiendo de la aplicación, uno es hepes + naoh y el otro es hepes + sal. los métodos específicos se resumen de la siguiente manera:

(1) 1 m de hepes + naoh, ph = 7.0 (500 ml)

119,15 g de hepes se disuelven en 400 ml de agua destilada, luego agregue 0,5 ~ 1m de solución acuosa Naoh para ajustar el pH, luego diluya a 500 ml con agua destilada, almacene a 4 ° c.

(2) hepes + sal (500 ml)

hepes 6.5g, nacl 8.0g, na2hpo4 • 7h2o 0.198g, ajuste el valor ph con 0.5m de solución acuosa naoh, diluya a 500ml.

hay dos formas de usar hepes ( cas: 7365-45-9 )

(1) de acuerdo con la concentración requerida, se puede agregar directamente al medio de cultivo y luego filtrar y esterilizar: se agregaron 2,38 g de hepes a cada medio de cultivo de 1000 ml, se ajustó el pH a 7,2 con 1n naoh, se filtró y se esterilizó. la concentración de hepes es 10 mmol / l.

(2) prepare una solución madre 100x (1 mol / l), tome 99 ml de medio de cultivo y 1 ml de solución madre, la concentración de la aplicación final es todavía de 10 mmol / l.

hepes ( modelo no .: q0005 ) pertenece al tampón del bien y tiene las ventajas de una alta solubilidad en agua, impermeabilidad de la membrana, resistencia química y resistencia a la enzimólisis, y no se combina con iones metálicos. pero debe tenerse en cuenta que la concentración final de hepes es de 10 ~ 50 mmol / l. en circunstancias normales, 20 mmol / l de hepes podrían lograr el efecto amortiguador, los investigadores deberían preparar la solución de acuerdo con la situación real con el hepes comercial.