trapeadores3- (n-morfolino)ácido propanosulfónico, es un tampón biológico, el rango del tampón es de 6,5 ~ 7,9, que es adecuado para el estudio de la transferencia de electrones y la fosforilación en una capa delgada de cloroplasto; se puede preparar en una variedad de agar, que se utiliza como un tampón no tóxico en el cultivo de Streptomyces coelicolus y la producción de cefalosporinas en el medio de cultivo límite. se puede utilizar como componente del sistema electrolítico en la electroforesis de enfoque isoeléctrico (ief) de la electroforesis en gel bidimensional. También se puede utilizar en la hibridación del norte como un tampón para la separación y transferencia de Arnorte.
un búfer tan importante, ¿cuál es la receta? Este artículo resume la receta de casi todos losbuffers de mops para su referencia.
(1)trapeadores buffer(10 ×)
reactivo |
cantidad (por 1 l) |
concentración final |
trapeadores libres de ácido, ultra puros |
41.86 g (o 46.26 g de la sal de sodio) |
0.2 m |
acetato de sodio anhidro |
4.1 g (o 6.8 g de acetato • 3h2o) |
0.05 m |
n / A2edta (0.5m, ph 7.5) |
20 ml |
0.01 m |
lleve el pH a 7.0 con naoh (o si se usa la sal de sodio de los trapeadores, entonces use ácido acético glacial para ajustar el pH). no autoclave Almacenar en la oscuridad, cubierto con papel de aluminio, a temperatura ambiente. la solución se volverá amarilla con el tiempo, pero esto es normal.
(2 buffer tampón de mops (5x)
reactivo |
cantidad (por 100 ml) |
concentración final (5x) |
mgso4 |
0.1204 g |
10 mm |
trapeadores |
10.463 g |
0.5 m |
Nacl |
14.61 g |
2.5 m |
Disuelva los reactivos mencionados anteriormente en 50 ml de h2o. ajuste el ph a 7.5 con naoh, y luego agregue h2o a 100 ml. Filtrar para esterilizar, y almacenar en la oscuridad.
(3) mops sales
reactivo |
trapeadores |
tricina |
feso4• 7h2o |
Nueva Hampshire4cl |
k2asi que4 |
cacl2• 2h2o |
mgcl2 |
nacl |
cantidad |
400mm |
40mm |
0.1mm |
95mm |
2.8mm |
5μm |
5.3mm |
0.5m |
Disolver en un volumen final de 1 litro y esterilizar por filtración. Agregue 10 μl de micronutrientes por litro antes de usar.
(4) mops-egta buffer
reactivo |
cantidad (por 1 l) |
concentración final |
trapeadores |
20.9 g |
0.1 m |
mgso4 |
0.24 g |
2 mm |
egta |
0.38 g |
1mm |
nacl |
29.2 g |
0.5 m |
disolver los reactivos anteriores en 800 ml de hidrocarbonato de dietilo (depc) tratado con agua. ajuste el ph a 7.5 con naoh y luego agregue h2o tratado con depc para obtener un volumen final de 1 l. esterilizar el tampón utilizando un filtro de 0,22 m m. El tampón se puede almacenar a temperatura ambiente durante varios meses.
(5) trapeadores de electroforesis buffer
Mops de 0,2 m (ph 7.0), acetato de sodio de 20 mm, edta de 10 mm (ph 8.0).
para una solución 10x: disuelva 41.8 g de trapeadores en 700 ml de h 2o tratado con dietil pirocarbonato (depc). ajusta el ph a 7.0 con 2 n naoh. agregue 20 ml de dietil pirocarbonato (depc) tratado con 1 m de acetato de sodio y 20 ml de dietil pirocarbonato (depc) tratado con 0,5 m de edta (ph 8.0). ajustar el volumen de la solución a 1 litro con hidratante tratado con dietil pirocarbonato (depc). esterilice la solución pasándola a través de un filtro millipore de 0,45 µm y guárdela a temperatura ambiente protegida de la luz. El tampón se pone amarillo con la edad si se expone a la luz o se esteriliza en autoclave. el tampón de color pajizo funciona bien, pero el tampón más oscuro no.
(6 buffer búfer de fijación pfa-mops-egta
Reagent |
cantidad (por 50 ml) |
concentración final |
paraformaldehido |
2 g |
4% (w / v) |
naoh |
(1 n) 5 ml |
/ |
hcl |
(1 n) 5 ml |
/ |
mops-egta buffer |
to 50 mL |
/ |
hacer fresco para disolver el paraformaldehído, agregue 2 g a 5 ml de 1 naoh. Calentar a 60 ° C para disolver, y agregar 5 ml de 1 n hcl y 35 ml de tampón mops-egta. ajuste el pH a 7.5 si es necesario y luego agregue el tampón mops-egta para obtener un volumen final de 50 ml. Almacenar el tampón a 4 ° C durante varios días.
Espero que estas recetas puedan ayudarte a tener éxito en tus experimentos.
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