tris (hidroximetil) aminometano(tris) solución tampón es un reactivo biológico, que es una solución tampón comúnmente utilizada en la preparación biológica y la preparación médica. se usa comúnmente en: gel de electroforesis, como tae o tbe; preparación de tampón laemmli; preparar el buffer de ejecución y el buffer de carga junto con glicina y sds; tampón de unión y un eluyente en cromatografía de intercambio aniónico; hibridación de ADN y escisión de ADN. A continuación, le presentaremos los ricipes de los buffers para los experimentos de rna con tris.
(10 ×)
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reactivo |
cantidad (por 1,0 ml) |
concentración final(10 ×) |
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tris - hcl (1 m, ph 8.0) |
500 µl |
0.5 M |
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mgcl2 (1 metro) |
150 µl |
0.15 M |
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ditiotreitol (dtt) (0,5 metro) |
66 µl |
33 mm |
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h2o |
284 µl |
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(2 ×)
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reactivo |
cantidad (por 1.0ml) |
concentración final (2 ×) |
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atp (100 mm) |
10 µl |
1 mm |
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tris - hcl (1 m, ph 8.0) |
200 µl |
200 mm |
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mgcl2 (1 metro) |
20 µl |
20 mm |
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dtt (1 metro) |
6.6 µl |
6,6 mm |
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dmso |
200 µl |
20% (v / v) |
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glicerol (ultrapuro) |
300 µl |
30% (v / v) |
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h2o |
a 1 ml |
- |
tris-hcl (10 mm, ph 7.6)
edta (1 mm)
Dodecil sulfato de sodio (sds) (0,5%, p / v)
3. ARN vinculante
1 x solución salina tamponada con tris (tbs)
0,05% entre 20 y 20
2 mm mgcl2 (libre de casos)
Tris de 10 mm (ph 7.5, sin caso)
137 mm nacl (sin caso)
3 mm kcl (sin caso)
2 mm mgcl2 (libre de casos)
2% de albúmina de suero bovino (bsa)
10 µg / ml ssdna
10 µg / ml de trna de levaduraCombine todos los ingredientes excepto ssdna y levadura trna.
4. tampón de lisis para rna de levadura
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reactivo |
cantidad (por 100 ml) |
concentración final |
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tris – hcl (1 m, ph 6.8) |
5 ml |
50 mm |
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nacl (1 metro) |
10 ml |
100 mm |
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edta (0.5 m, ph 8.0) |
2 ml |
10 mm |
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ddh2o |
a 100 ml |
– |
5. tampón de recocido de ARN (10x)
0.5 m nacl
Ditiotreitol 100 mm.
100 mm mgcl2
100 mm tris-hcl (ph 7.5)
6. rna buffer de transcripción
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reactivo |
cantidad a sumar |
concentración final |
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mgcl2 (1 m) |
300 μl |
30 mm |
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nacl (5 m) |
100 μl |
50 mm |
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espermidina (1 m) |
100 μl |
10 mm |
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tris-hcl (1 m) (ph 7.9) |
2 ml |
200 mm |
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h2o, libre de nucleasas |
7.6 ml |
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7. tampón de transcripción para la polimerasa de ARN (5 ×)
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reactivo |
cantidad (por 10 ml) |
concentración final |
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tris – hcl (1 m, ph 8.0) |
2 ml |
200 mm |
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mgcl2 (1 metro) |
400 µl |
40 mm |
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nacl (5 metro) |
0.5 ml |
250 mm |
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espermidina (100 mm) |
1 ml |
10 mm |
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h2o |
6.1 ml |
– |
en el uso de tris, se debe tener en cuenta que el ph del tampón tris se ve muy afectado por la temperatura y la concentración, por lo que el entorno debe considerarse durante el proceso de preparación.
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