glucanoLas fosfatasas son esenciales para la degradación normal del almidón en las plantas y el glucógenometabolismo en mamíferos. arabidopsisfosfatasas de fosfoglucano de thalianael exceso de almidón 4 (sex4) es uno de los representantes fundamentales de una especificidad dual típicafosfatasas (dsps).

carrillo et al.(doi: 10.1016 / j.ab.2016.11.005) informan dos métodos en ensayos en gel para glucanodetección de fosfatasa. y sex4 fue seleccionado como modelo que e .coli alcalinofosfatasa (ap) se usó como control. un método para la detección de la actividad utilizadapnpp y el segundo aplica bcip / nbt. En primer lugar, los geles preparados eranya sea teñido con azul de Coomassie o desarrollado para actividad de fosfatasa usandopnpp o la copule bcip / nbt. dos fosfatasas ensayadas mostraron una sola, clara,banda cromogénica fácilmente visible que es coincidente con el azul de Coomassiemanchando

la sensibilidadde los dos métodos se comparó aumentando la cantidad de enzimas cargadas alos geles nativos para ambos métodos, encontraron que la intensidad de la banda es directamenteproporcional a la mu de la enzima sex4 cargada en cada carril. el experimentallos resultados mostraron que el ensayo de fosfatasa pnpp es posible detectar hasta 0,34mu de actividad sex4 en los geles. y el ensayo de fosfatasa bcip / nbt es posibledetectar hasta 0,86 mu de actividad sex4.

el trabajo decarrillo et al. demostró que pnpp y bcip / nbt son muy buenos sustratospara la visualización de las enzimas de actividad de la glucano fosfatasa después de geles de página nativosya que la enzima sex4 se detectó fácilmente. y la comparación entre pnpp ybcip / nbt mostró que pnpp sería un mejor sustrato para la detección de glucanofosfatasas. y especulan que dos ensayos informados aquí podrían serextrapolado para probar otras glucano fosfatasas.

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