la albúmina sérica (sa) es una de las proteínas más abundantes en la circulación sanguínea, y tiene importantes funciones fisiológicas como el almacenamiento, el transporte y la protección del organismo. se ha utilizado la albúmina de suero bovino (bsa) como modelo de proteína ideal para el estudio de propiedades fisicoquímicas, estructura y función debido al peso molecular relativamente pequeño ya la solubilidad. El ácido 8-anilino-naftaleno-1-sulfónico (ans) y sus sales de amonio son intermedios de diversos colorantes azoicos y se usan comúnmente como sondas fluorescentes. en este trabajo, introduciremos la interacción entre ans y bsa, y cambios conformacionales de bsa en el método de fluorescencia con ans como sonda.

interacción de ans y bsa

como una sonda fluorescente hidrofóbica, ans (o ans-nh4) es ampliamente utilizado para estudiar los cambios conformacionales de bsa. la interacción entre los dos es principalmente la atracción electrostática [1], ans y bsa tienen un fuerte sitio de unión, donde la interacción electrostática juegan un papel importante. la presencia de grupos ácido sulfónico jugó un papel enorme. las moléculas de ácido sulfónico son solubles en agua, tienen una gran polaridad de la superficie y flexibilidad molecular, y pueden actuar con grupos cargados de proteína por atracción electrostática. debido a una mayor flexibilidad molecular, es más adecuado para el ensamblaje del área hidrofóbica de la proteína. y el grupo ácido sulfónico aumenta el soluble en agua de ans, y el contacto con bsa más fácilmente. al mismo tiempo, es menos probable que el aumento de la polaridad de la superficie de la ansa penetre en el biofilm lipídico, reduciendo su riesgo de entrar en el cuerpo biológico.

cambios de bsa en solución

con ans como sonda fluorescente, se estudió el cambio de fluorescencia endógena del residuo hidrofóbico de triptófano y su microambiente para detectar el cambio conformacional de bsa en solución.

solución de clorhidrato de guanidina

solución de urea

en comparación con el clorhidrato de guanidina, bsa es más estable en la urea [3]. los cambios de bsa en la urea y la concentración crítica de cambio conformacional se describieron de acuerdo con el cambio de los parámetros de fluorescencia. los resultados mostraron que los cambios conformacionales de bsa también incluyeron el cambio de residuo de triptófano y la región de unión de la sonda ans en el proceso de desnaturalización de urea con el aumento de la concentración de urea: la región de unión de sonda es más sensible a urea y la baja -concentración desnaturalizante puede hacer que sus cambios conformacionales se pierdan y se expongan al disolvente hidrófilo. la región de residuos de triptófano es resistente a bajas concentraciones de urea (0 ~ 1,0mol • l-1), el proceso de desnaturalización se somete a un proceso triaxial con contracción-extensión y su tasa de cambio conformacional alcanza un máximo a una concentración de 3,0 ~ 5,0 mol • l-1, y la concentración crítica a 5,4 mol • l-1, el residuo de triptófano ha sido completamente expuesto al disolvente a una concentración de 7,8 mol • l-1 y en un estado despolarizado irreversible.

para entender la interacción entre ans y bsa y estudiar el cambio de conformación de proteínas desde el nivel molecular, establecer la ley de conformación de proteínas con el cambio de ambiente, podría proporcionar más información relevante y teoría para la investigación de proteínas y el progreso de la biología genética y medicina molecular.

referencias

[3] zhang jiaxing, jin ke, yin zongning. caracterizan el proceso de desnaturalización de la albúmina sérica bovina en urea por parámetros de fluorescencia. diario farmacéutico del huaxi, 2012,27, 371 ~ 375.