CHAPS es un compuesto orgánico con fórmula molecular C ₃₂ H ₅₈ N ₂ O ₇ S y peso molecular 614.877. CHAPS es un tipo de detergente zwitteriónico, ampliamente utilizado en el proceso de purificación de proteínas. CHAPS también se puede utilizar en la investigación bioquímica para desnaturalizar y dividir células, extraer ARN y ADN; Además, CHAPS también se puede utilizar para la preparación de solución tampón. La patente CN102796726B divulga un método para extraer ácido nucleico de microorganismos mixtos. Esta semana, el editor de YACOO presentó brevemente la composición del reactivo para el craqueo de microorganismos mixtos y el método para extraer ácido nucleico del craqueo de microorganismos mixtos.  

El reactivo para el craqueo de microorganismos mixtos consiste en extracto A y extracto B.

Método de preparación del extracto A

Tris, EDTA, SDS, Tween 80, Triton X-100, Brij 58, CHAPS, dodecil sarcosina de sodio β - sulfhidrilo etanol y agua se mezclaron para obtener el extracto A, en el que la concentración de CHAPS en el extracto A fue de 0,05% - 0,2% (porcentaje de volumen);

Método de preparación del extracto B

El fenol, etanol y pirrolidona saturados con agua se mezclaron para obtener la solución de extracción B. La relación de volumen de fenol, etanol y pirrolidona saturados con agua fue 98:1:1.

El extracto A, el ARN transportador y el microorganismo mixto se mezclan y luego se mezclan con el extracto B para la reacción y obtener la solución de reacción; Centrifugar y recoger la fase acuosa superior para obtener el lisado microbiano mixto.

Esta patente proporciona un método de extracción de ácido nucleico microbiano mixto, que puede extraer simultáneamente ácido nucleico de muestras mixtas de virus, bacterias gramnegativas, bacterias grampositivas, micoplasma y clamidia. Sus principales características son operación simple, bajo costo y buen efecto de extracción.

Referencia

CN102796726B Extracción de ácido nucleico de microorganismos mixtos.